偽狂犬病毒gE蛋白抗體檢測試劑盒使用說明

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臨床意義

      豬偽狂犬gE鑒別ELISA診斷試劑盒用于檢測豬血清中抗偽狂犬病毒gE蛋白的抗體。用于區別臨床野毒感染豬和用gE基因缺失疫苗免疫的豬。
 

試劑組成

操作程序
1.洗滌液配制：使用前，濃縮的洗滌液應恢復至室溫（25℃左右）,并搖動使沉淀的鹽溶解（在37℃水中加熱5-10），然后用蒸餾水或去離子水作20倍稀釋，稀釋好的洗滌液在4℃可以存放7天。
2.樣本稀釋：用樣本稀釋液（5號液）將待檢血清按1:40稀釋，如取5ul血清與195ul樣本稀釋液，充分混勻；注意：陽性對照和陰性對照也按1：40稀釋。

3.加樣反應：取出所需反應板條，將稀釋好的待檢血清取100μl加入到檢測板孔中。陰性對照和陽性對照各設2孔，每孔100μl。輕輕振勻孔中樣品（勿溢出），置37℃溫育30分鐘。甩掉板孔中的溶液，用洗滌液洗板5次，200μl/孔，每次靜置3分鐘倒掉，再在干凈吸水紙上拍干。
4.加酶反應：每孔加酶結合物（1號液）2滴（100μl），置37℃溫育30分鐘。洗滌5次, 方法同3。切記每次在干凈吸水紙上拍干。
5.顯色反應：每孔先加底物（3號液）一滴（50µl）、再加顯色劑（4號液）一滴（50µl），混勻，室溫（18℃-25℃）避光顯色10分鐘。每孔加終止液（6號液） 1滴（50μl），10分鐘內測定結果（檢測前在震蕩器上輕輕震動一下）。

結果判斷
       在酶標儀上測各孔OD630值，試驗成立的條件是陽性對照孔OD630值應≥0.8，陰性對照孔OD630值平均值必須低于0.3。 樣品孔OD630值大于0.33，判為陽性；樣品孔OD630值小于0.30，判為陰性, 樣品OD630值在0.30到0.33之間，判為可疑。

注意事項
      1.試劑盒在2-8℃下保存，每次取出時先平衡至室溫后使用。滴瓶每次用后一定要將蓋擰緊，各瓶蓋之間切不可混用。各試劑盒之間不可混用。
      2.待檢血清樣品數量較多時，應先使用血清稀釋板稀釋完所有要檢測血清，再將稀釋好的血清轉移到檢測板， 使反應時間*。
     3.濃縮洗滌液用蒸餾水或去離子水稀釋，如果發現有結晶加熱使其溶解后再使用。

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