腦膜炎奈瑟菌血清群A鑒定

廣州健侖生物科技有限公司

【儲藏條件】

2~8℃避光保存，在標明的有效期內(nèi)使用。

【有效期】

24個月

【產(chǎn)品名稱】

通用名：腦膜炎奈瑟菌診斷血清英文名：antisera for N.meningitidis

【產(chǎn)品說明】

本套血清用于A、B、C、W、X、Y等6個常見血清QUN（serogroup）腦膜炎奈瑟菌的血清群鑒定，將相應血清群腦膜炎奈瑟菌制備滅活抗原，免疫家兔所得，血清產(chǎn)品經(jīng)免疫吸附去除了非特異性凝集成分，具有效價高，特異性強的特點。

腦膜炎奈瑟菌血清群A鑒定

【規(guī)格】

每種血清群1瓶，每瓶2ml，均為使用液。

【使用方法】

1.產(chǎn)品在使用前，由冰箱拿出，恢復溫度到室溫后使用。

2.樣品分離培養(yǎng)物，經(jīng)鏡檢和生化鑒定，確定為腦膜炎奈瑟菌后，再進行血清分群檢測，如果未能確定為腦膜炎奈瑟菌，不宜直接進行血清凝集檢測，以免產(chǎn)生假陽性結(jié)果。

3.待鑒定細菌在血平板或巧克力平板上，5% CO₂，培養(yǎng)48小時。

4.用酒精擦拭玻璃片。

5.用蠟筆或防水筆將玻璃片分為8個方格。

6. 在玻片每個方格的下半部分，用移液器加5%的福爾馬林溶液（基于生物安全目的）。

7. 用無菌或一次性10μl接種環(huán)挑取BAP平板上過夜培養(yǎng)的細菌菌落。

8. 在玻片上將細菌與5%的福爾馬林溶液混勻，混勻后的液體應該不透明，在加抗血清前應保持細菌懸液不干燥。

9. 在玻片的上方加10μl血清群特異的抗血清，同時在陰性對照側(cè)加BS或者生理鹽水。

10. 緩慢的混合細菌懸液和抗血清，使上部的抗血清和下部的細菌懸液充分混合1-2分鐘。不要做旋轉(zhuǎn)晃動，以免不同血清群的血清會相互混合污染。

11.在燈光下，黑暗背景條件下觀察結(jié)果。1-2分鐘內(nèi)呈2+及以上凝集現(xiàn)象為陽性，1-2分鐘內(nèi)呈現(xiàn)2+以下凝集現(xiàn)象為陰性。如果過了2分鐘，才發(fā)生的凝集反應按陰性處理。

【凝集反應的強度等級】

當抗血清與細菌接觸，會引起凝集反應，使細胞（細菌）凝集或呈簇，細胞（細菌）上清液變得清亮，細胞懸液濃度或使用的抗血清濃度不同，會產(chǎn)生不同的強度的凝集反應，見圖示

4+ 所有的細胞都發(fā)生凝集，細胞懸液清亮。

3+ 75%的細胞發(fā)生凝集，細胞上清略微渾濁不清。

2+ 50%的細胞發(fā)生凝集，細胞上清略微渾濁不清。

1+ 25%的細胞發(fā)生凝集，細胞上清略微渾濁不清。

+/- 少于25%的細胞發(fā)生凝集，可見有顆粒狀的成分。

0 沒有肉眼可見的凝集，上清懸液渾濁、平滑。

【血清群確定】

1. 1-2分鐘內(nèi)，出現(xiàn)3+或4+凝集為陽性反應（強陽性反應）。對于B群腦膜炎奈瑟菌來說，如果出現(xiàn)2+及以上的凝集則可認為陽性。

2. 陰性反應是+/-、1+ 或 2+（弱凝集）的凝集程度。

3. 當菌株僅與一種抗血清出現(xiàn)凝集，但和生理鹽水不凝集時才能鑒定為該種血清型。

4. 如果不能確定血清群，菌株記為不能分群腦膜炎奈瑟菌（NG）。

5. 關(guān)于不能分群腦膜炎奈瑟菌（NG）菌株。

6. 在生理鹽水中凝集，無論與任何抗血清發(fā)生強反應，都應標記為自凝菌。

7. 在生理鹽水中不自凝，和多種血清出現(xiàn)凝集，記為NG。

8. 不和生理鹽水凝集，也不和任何一個血清凝集也記作NG。

【結(jié)果難以判斷時解決方案】

腦膜炎奈瑟菌具有可變性（有莢膜與無莢膜，小菌落與大菌落，慢生長與快生長，強凝集與弱凝集），有時候很難清除解釋結(jié)果，一些建議如下：

1. 挑取同一平板上的另一個細菌克隆進行重復凝集試驗。

2. 如果玻片上的結(jié)果不明確，將試管中配置懸液，重復該試驗。

3. 加20µl抗血清直接涂于玻片上，直接加一環(huán)細菌進行混均凝集。

4. 再次培養(yǎng)，第二天進行重新試驗。

5. 如果當天的平板上有各種大小不一的菌落，每種菌落再次分離純培養(yǎng)，第二天每種菌落進行試驗。大菌落一般會有比較好的凝集反應，小菌落次之。

6. 如果試驗中的問題還是不能解決，應當和對照菌株同時進行試驗，確保試劑的正確性。

【血清質(zhì)量控制】

在對未知的菌落進行血清分群之前，應選用一套腦膜炎奈瑟菌參考菌株（A, B, C, W, X, Y）和一株可分群的腦膜炎奈瑟菌進行質(zhì)量控制檢測。操作步驟：

1. 新購進的每一批次抗血清要用參考菌株進行檢測。

2. 半年后重復質(zhì)量控制檢測

3. 如果血清管暴露于超過4℃環(huán)境，或者懷疑血清被污染時，也要對血清進行重新的質(zhì)量控制。

4. 關(guān)于血清分群和質(zhì)量控制，每一批次的抗血清需要使用所有的參考菌株進行實驗室驗證，記錄質(zhì)量控制驗證結(jié)果。

【血清質(zhì)量控制檢測結(jié)果判讀】

1. 通過質(zhì)量控制檢測

與同源性的抗原反應，1-2分鐘內(nèi)，出現(xiàn)3+或 4+程度的凝集；單一血清群的抗血清不與其他血清群的腦膜炎奈瑟菌反應，不與NG菌株凝集反應，鹽水不自凝。

2. 分群血清質(zhì)量控制檢測失敗

如果抗血清與一種或多種參考菌株凝集反應，或/和NG參考菌株反應，鹽水自凝，則血清不能使用。

【其他所需材料】

潔凈玻片、生理鹽水（0.85%的氯化鈉溶液）、5%的福爾馬林溶液、接種環(huán)或移液器。

【注意事項】

1. 本產(chǎn)品只能作為腦膜炎奈瑟菌血清型判定的輔助方法，zui終的判定需形態(tài)學、生化方法和血清學方法共同進行。

 2. 本產(chǎn)品應避免冷凍。反復凍融會使血清產(chǎn)生沉淀。

3. 本產(chǎn)品在保存過程中可能會產(chǎn)生渾濁或沉淀，這并不表示該產(chǎn)品已被污染。離心或者過膜去掉渾濁或沉淀后，可以正常使用。

4. 本產(chǎn)品含有0.1%*作為防腐劑，丟棄時需倒入下水管，并用大量的水沖洗下水管。

廣州健侖生物公司提供SSI血清產(chǎn)品，包括沙門氏菌，志賀氏菌，大腸桿菌，肺炎鏈球菌，嗜血桿菌等。并且提供德國有名血清品牌SiFin的核心血清產(chǎn)品，德國SiFin血清質(zhì)量好，實驗*，已被各高校實驗室，研究所列為推薦血清產(chǎn)品！詳情可咨詢工作人員！

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90%左右由病毒引起，細菌感染常繼發(fā)于病毒感染之后。該病四季

、任何年齡均可發(fā)病，通過含有病毒的飛沫、霧滴，或經(jīng)污染的

用具進行傳播。常于機體抵抗力降低時，如受寒、勞累、淋雨等

情況，原已存在或由外界侵入的病毒或/和細菌，迅速生長繁殖，

導致感染。該病預后良好，有自限性，一般5-7天*。常繼發(fā)支

氣管炎、肺炎、副鼻竇炎，少數(shù)人可并發(fā)急性心肌炎、腎炎、風

濕熱等。臨床上供選擇的抗生素日益增多，耐藥菌株亦明顯增多

，由于大劑量頭孢菌素的應用，導致院內(nèi)感染特別是假單孢銅綠

桿菌和腸球菌感染日益增多。血清學和分子生物學研究的進展，

使人們對支原體、衣原體感染或軍團菌感染的認識有很大提高。

氟喹諾酮類、大環(huán)內(nèi)酯類等已引起人們重視。
無論是下呼吸道感染還是上呼吸道感染，絕大部分是由病毒引起

的，稱為：病毒性呼吸道感染。
多種病毒引起的急性呼吸道感染。分病毒性上呼吸道感染和病毒

性下呼吸道感染，前者表現(xiàn)為急性鼻炎、咽炎和喉炎，后者表現(xiàn)

為急性氣管炎、支氣管炎和肺炎。本類疾病發(fā)病率高，人群普遍

易染，小兒、老人、營養(yǎng)不良及患有慢性病者更易患病。以冬春

季發(fā)病較多。不少呼吸道傳染病如麻疹、風疹等可表現(xiàn)為上呼吸

道感染癥狀，應注意鑒別上呼吸道感染和下呼吸道感染。
作為兒科的常見病、多發(fā)病，呼吸道感染是引起世界范圍內(nèi)5歲以

下兒童死亡的*原因，其臨床表現(xiàn)易被認識，但引起呼吸道感

染的病因卻很難明確。通過常規(guī)方法大約只能明確46%為獲得性肺

炎病因，對于病毒引起的下呼吸道感染， 只有40%能明確病毒病

原 。呼吸道合胞病毒、副流感病毒、流感病毒是引起兒童下呼吸

道感染和毛細支氣管炎的常見病毒，仍然有超過1/3的病例不能明

確病原。作為兒科的常見病、多發(fā)病，呼吸道感染是引起世界范

圍內(nèi)5歲以下兒童死亡的*原因，其臨床表現(xiàn)易被認識，但引起

呼吸道感染的病因卻很難明確。通過常規(guī)方法大約只能明確46%為

獲得性肺炎病因，對于病毒引起的下呼吸道感染， 只有40%能明

確病毒病原 。
About 90% caused by the virus, bacterial infection often secondary to viral infection. The disease four seasons

Any age can be sick, through the droplets containing the virus, droplets, or contaminated

Dissemination of appliances. Often in the body to reduce resistance, such as cold, tired, rain and so on

The situation, the virus that originally existed or invaded by the outside world or / and bacteria, rapid growth and reproduction,

Cause infection. The disease prognosis is good, self-limiting, usually 5-7 days recovery. Often secondary support

Bronchitis, pneumonia, sinusitis, a few can be complicated by acute myocarditis, nephritis, wind

Hot and humid. Increasing number of clinically available antibiotics, drug-resistant strains also increased significantly

, Due to the use of high-dose cephalosporins, leading to nosocomial infections especially Pseudomonas

Bacilli and enterococci infections are increasing. Advances in serology and molecular biology,

Make people's understanding of Mycoplasma, Chlamydia infection or Legionella infection has greatly improved.

Fluoroquinolones, macrolides have attracted people's attention.
Whether it is lower respiratory tract infection or upper respiratory tract infection, the vast majority are caused by the virus

Called: viral respiratory tract infection.
A variety of acute respiratory infections caused by the virus. Divided viral upper respiratory tract infection and virus

Lower respiratory tract infection, the former showed acute rhinitis, pharyngitis and laryngitis, the latter performance

For acute bronchitis, bronchitis and pneumonia. The incidence of this disease is high, the crowd is widespread

Easy to dye, children, the elderly, malnutrition and those with chronic diseases are more susceptible. In winter and spring

More seasonal disease. Many respiratory infectious diseases such as measles, rubella can be manifested as breathing

Road infection symptoms, attention should be paid to identify upper respiratory tract infection and lower respiratory tract infection.
As a common pediatric disease, frequently-occurring disease, respiratory infections are caused worldwide 5 years old

The first cause of death in children, its clinical manifestations are easily recognized, but cause respiratory sensation

The cause of the dye is difficult to be clear. Approximay 46% of acquired lungs are defined by conventional methods

The cause of inflammation, only about 40% of the virus caused by lower respiratory tract infection can be clear virus

Original Respiratory syncytial virus, parainfluenza virus, influenza virus is caused by children's lower respiratory tract

Infection and bronchiolitis common viruses, there are still more than 1/3 of the cases can not be understood

Really pathogens. As a common pediatric diseases, frequently-occurring disease, respiratory tract infection is caused by the world

The first cause of death among children under 5 years of age is that their clinical manifestations are known but cause

The cause of respiratory infections is difficult to determine. Only about 46% can be defined by conventional methods

The cause of acquired pneumonia, for the virus caused by lower respiratory tract infection, only 40% of the bright

Indeed virus pathogen.