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ASFV檢測非洲豬瘟診斷試紙卡

廣州健侖生物科技有限公司

廣州健侖生物可提供適合：生豬屠宰場、養豬場、肉類加工廠等單位針對非洲豬瘟的檢測系統?？梢宰龅皆谑宸昼妰葘Ψ侵挢i瘟病毒進行排查監測，也可以在三十分鐘內對非洲豬瘟病毒核酸進行檢測鑒定。

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我司還提供其它進口或國產試劑盒：登革熱、瘧疾、流感、A鏈球菌、合胞病毒、腮病毒、乙腦、寨卡、黃熱病、基孔肯雅熱、克錐蟲病、違禁品濫用、肺炎球菌、軍團菌等試劑盒以及日本生研細菌分型診斷血清、德國SiFin診斷血清、丹麥SSI診斷血清等產品。

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五、注意事項
1、用于裂解的噬菌體、宿主菌為新鮮培養獲得時，裂解好、裂解噬菌體收獲量大。
2、液體培養裂解時，如到培養時間時裂解尚未發生，可適當提高培養溫度或加大搖震速度。
3、RNase A 、DnaseI消化不全，DNA、RNA可粘走部分噬菌體。
4、苯酚/*抽提時，注意PEG、蛋白質等雜質污染，它們會影響限制性內切酶切割。
1、按0.1-0.01的感染復數（MOI）將噬菌體接種到200ml對數生長期的菌液，培養至菌液變澄清。
2、按1%的比例(v/v)加入*，37°C振蕩30min，裂解菌體。
3、裂解后的菌液于8000g離心5min，然后用0.22μm孔徑濾膜過濾。
4、濾液中加入216μl緩沖液L1（20mg/ml RNase A，6mg/ml DNase I，0.2mg/mL BSA，10mM EDTA，100 mM Tris-HCl和300 mM NaCl，pH 7.5），在37°C輕輕振蕩1小時。
5、然后加入30ml冰冷的緩沖液L2（30%聚乙二醇（PEG）6000，3M NaCl），4°C放置過夜。
6、4°C 10000g離心30分鐘。
7、棄上清，沉淀用用9ml緩沖液L3（100mM Tris-HCl，100mM NaCl，25mM EDTA，pH7.5）重懸。
8、然后加入9ml緩沖液L4（4% SDS），70°C孵育20min。
9、冰浴冷卻后，加入9ml緩沖液L5（2.55 M醋酸鉀，pH 4.8），4°C 10000g離心30min。
10、上清液用核酸提取純化試劑盒（如QIAGEN-tip 100）提取噬菌體基因組DNA。