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裂谷熱病毒IGM抗體酶聯(lián)免疫試劑盒

廣州健侖生物科技有限公司

依流行病學(xué)資料和臨床表現(xiàn)可作初步診斷。依病毒分離（取患者病初3天的血清接種于小白鼠），或雙份血清特異抗體效價(jià)呈上升則可確診。急性裂谷熱可采用不同方法進(jìn)行診斷，在發(fā)病早期階段或在尸體解剖組織中，可檢出此種病毒。諸如酶聯(lián)免疫分析一類(lèi)的血液檢測(cè)（“ELISA”或“EIA”酶標(biāo)法），可證實(shí)存在特異性免疫球蛋白M（IgM）病毒抗體。采用各種不同方法，包括病毒分離（在細(xì)胞培養(yǎng)或接種過(guò)的動(dòng)物身上）、抗原檢測(cè)試驗(yàn)和擴(kuò)增核糖核酸基因組（RT-PCR），在發(fā)病早期階段或在尸體解剖組織中，均可檢出此種病毒。

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一、酵母人工染色體的概念

酵母人工染色體（Yeast artificial chromosomes，YAC）是一種穿梭克隆載體，可以克隆長(zhǎng)達(dá)400Kb的DNA片段，含有質(zhì)?？寺≥d體所*的*受體大腸桿菌的質(zhì)粒復(fù)制起始位點(diǎn)(ori)，還含有第二受體酵母天然染色體所必需的功能元件，包括兩個(gè)端粒、一個(gè)著絲點(diǎn)和一個(gè)DNA復(fù)制起始位點(diǎn)。

YAC載體在*受體大腸桿菌細(xì)胞內(nèi)可以按質(zhì)粒復(fù)制形式進(jìn)行高拷貝復(fù)制。將載體在體外與目的DNA片段重組后，轉(zhuǎn)化第二受體酵母細(xì)胞，可在酵母細(xì)胞內(nèi)按染色體DNA復(fù)制的形式進(jìn)行復(fù)制。篩選*受體的克隆子，一般采用抗菌素抗性選擇標(biāo)記；而篩選第二受體的克隆子，常用與受體互補(bǔ)的營(yíng)養(yǎng)缺陷型。

二、YAC載體的核心組成元件

YAC載體的復(fù)制元件是其核心組成元件，其在酵母中復(fù)制的必需元件包括復(fù)制起點(diǎn)序列，即自主復(fù)制序列（autonomously replicating sequence，ARS）、用于有絲分裂和減數(shù)分裂功能的著絲粒（centromere，CEN）和兩個(gè)端粒（TEL）。

YAC載體為能夠滿足自主復(fù)制、染色體在子代細(xì)胞間的分離及保持染色體穩(wěn)定的需要，必須含有以下元件：

（1）端粒重復(fù)序列（telomeric repeat，TEL）：定位于染色體末端的一段序列，用于保護(hù)線狀的DNA不被胞內(nèi)的核酸酶降解，以形成穩(wěn)定的結(jié)構(gòu)。